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通过学习你认为免疫学的技术与原理在生物学科中有何应用前景?


来源:澳门葡京      发布时间:2020-01-19 09:51     点击率:

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  展开全部免疫学技术在国内外的应用已日趋广泛。近年来,它已从早年应用于微生物学发展到应用于生物医学研究的许多方面,包括各种免疫活性细胞及其众多的细胞因子的研究,蛋白、核酸和酶的研究。各种激素和各类药物半抗原的检测,以及寄生虫学、病理学和临床各科的研究。目前,它已成为新兴学科分子生物学和细胞生物学研究的重要工具之一。

  简单介绍以下几种免疫学应用技术:免疫印迹技术、放射免疫技术、免疫酶技术、免疫荧光定位技术、免疫胶体金技术、细胞免疫技术等。

  将用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE分离得到的按分子量大小排列的非标记蛋白转移到固相载体膜上,再用标记的特异性的抗血清或单克隆抗体对蛋白质进行定性及定量分析的技术,如Western blot,其鉴定蛋白质的敏感性约为1—5ng。

  用于检测可溶性抗原、细胞成分的鉴定与分析,检测与自身变性细胞核成分结合的抗体(抗核抗体),HIV的明确诊断。

  用放射性同位素标记抗原或抗体进行的免疫测定。既有同位素的敏感性又有抗原抗体结合的特异性,同时具有重复性好、准确性高、标本用量少等优点。广泛应用于激素、药物等微量物质的检测。

  将抗原—抗体反应的高度特异性与酶对底物的高效催化作用有效地结合起来,通过酶分解底物产生有色物质(也可作用于荧光底物,产生荧光),肉眼观察颜色深浅或酶标仪测定光密度值(OD),以反映抗原或抗体的含量。如ELISA,ELISPOT等。

  用荧光素标记一抗或二抗,检测特异性抗原或抗体的方法。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(nuoresceinisothiocyanate,FITC)、藻红蛋白(phycoerythrin,PE)等。在激发光的作用下,可直接发射荧光,前者发黄绿色荧光,后者发红色荧光。

  利用氯金酸(HAuCl+)在还原剂作用下,产生分散状态的胶体金颗粒的性质。在碱性条件下,金颗粒表面带负电荷,与蛋白质正电荷基团结合。胶体金可标记白蛋白、免疫球蛋白、糖蛋白、激素、脂蛋白、植物血凝素、卵白素等。大分子以单层形式吸附在金颗粒表面。不同还原剂作用于氯金酸,产生的胶体金粒径大小不相同(5—50nm),小粒径的胶体金由于穿透性好,电子密度高,常被用于免疫电镜技术。这些小粒径的金颗粒,经银显影液处理后,金粒子还原银离子生成银颗粒而吸附在金颗粒周围呈黑褐色,从而放大了金颗粒的显色效果,又称免疫金银法。胶体金颜色随颗粒大小而变化,大于20nm的金颗粒在光镜下呈现砖红色,可在光镜水平行免疫分析,也可用银显影剂增强,进一步提高灵敏度。当胶体金的粒径较大、浓度密集时肉眼水平即可观察,即胶体金斑点渗滤试验和胶体金斑点免疫层析试验。

  用于免疫细胞功能的测定:T细胞(1. 使用酶、免疫荧光标记单抗进行鉴定 2. 淋巴细胞转化试验 3. E花环形成试验 4. 混合淋巴细胞培养 5. CTL介导的细胞毒试验),B细胞(1. 检测B细胞分化抗原 2. 测定B细胞产生抗体的能力 3. 溶血空斑试验 4.ELISPOT)

  用于检测细胞因子:1.生物活性检测(细胞增生或增生抑制法细胞病变抑制法趋化作用测定法)2. 免疫学检测法 3. 分子生物学技术

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