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微生物检测出现红色菌落是什么细菌


来源:澳门葡京      发布时间:2020-02-13 10:26     点击率:

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  展开全部细菌菌落总数是微生态制剂样品检测必做的一项指标。菌落总数检测同其他检验一样,也存在检测误差。平板计数法是检测饲料中细菌总数、活酵母数、芽孢杆菌数及乳酸菌数的常用方法之一,因此,该值准确与否直接关系到微生物饲料添加剂类产品的质量好坏。微生物平板计数的通常方法为每个样品用 3个稀释度,每个稀释度常做 3个重复。但如何对平板菌落进行正确计数、3个稀释度以哪一个稀释度进行计数及微生物检测允许误差等问题,在饲料标准中并未有所规定,而这些问题与统计值的准确性密切相关。我们就实际检测芽孢杆菌工作中遇到一些菌落计数的问题,与大家进行探讨。

  选择1个样品,称取10 g,放入无菌锥形瓶内,加入90 mL无离子水,磁力搅拌分别为l0、20、30、40和60 min。

  用1 mL移液枪从中吸取1 mL样品悬浊液加入到盛有9 mL去离子水的试管中,用振荡器使样品充分均匀,以此类推,制成10-1~1O-7不同稀释度的样品溶液。

  平板涂布法检测菌含量:用移液枪从样品稀释液中各吸取200uL,每个样品稀释液3个重复;将平板倒置于35-37℃培养箱中培养24 h。

  各个样品称取l0 g,放入无菌锥形瓶内,加入90 mL无离子水,磁力搅拌分别为40 min。并稀释成10-1~l0-7不同稀释度的样品溶液。

  倾注平板法检测菌含量:用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取1 mL,每个样品稀释液3个重复,待培养基表面干燥后,将平板倒置于35-37℃培养箱中培养24 h。

  平板涂布法检测菌含量:用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取200uL涂布平板,每个样品稀释液3个重复;将平板倒置于35~37℃培养箱中培养24 h。

  采用细菌平板计数的方法,不同振荡时间对合生素中芽孢杆菌检出量的结果见表1。从表l中可见:不同振荡时间获得的细菌菌落数量有较大差别。总体而言,在一定时间内,随着振荡时间的延长检出有效菌含量增加,说明细菌从载体上解析需要一定的时间;当振荡时间为40 min后产品中的菌含量基本稳定。采用适当振荡时间才能更精确的显示产品中有效菌的含量。

  采用不同的检测方法,对合生素中芽孢杆菌检出量的结果见表2。从表2可见:不同方法获得的细菌菌落数量有差别,倾注平板法相较平板涂布法检测的菌含量多,但基本在20%误差范围内。平板计数法操作相对简单、快捷且影响因素较少。倾注法培养基营养分布较均匀,对部分蔓延菌落能控制,但对操作人员熟练程度要求相对较高。

  固体样品要用均质器或玻璃珠等充分均质,也可在稀释液中添加相应溶解液(如吐温80和液体石蜡等)的稀释液,以保证样品的充分均质。

  测定芽孢杆菌活菌数时,不同振荡时间获得的细菌菌落数量有较大差别,因为细菌从载体上解析并均匀分散到溶液中需要一定的时间,待测样品应在振荡器上充分振荡,使得芽孢杆菌可以充分和均匀地分散到待测溶液中,避免因为菌体未完全释放而引起结果中细菌含量偏低的现象。

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